一、实验背景
结膜为一层富有血管的薄而透明的粘膜,覆盖于眼睑的内面和眼球的前面。按其所在部位分为睑结膜,球结膜和结膜穹窿。结膜有助于防止异物和感染对眼球的损害,但结膜本身也会受到化学物质或过敏物质的刺激,或受到病毒、细菌的感染,出现眼痛、眼痒及充血。由于眼结膜*的韧性,类似于纤维,手动研磨通常难以研磨充分;为了提高科研工作者的实验效率和研究进度,本方法采用上海净信多样品组织研磨仪,对样品进行研磨处理,以便于实验人员可以更好进行后续实验,如充分提取RNA、蛋白等。
二、研磨方法
1、实验步骤:
a,准备好待研磨的眼结膜100毫克,干净并灭菌的2ml钢罐一套及研磨珠若干,液氮一升;
b,将样品置于2ml钢罐中,将其整个浸入液氮中5mins,然后安装到上海净信多样品组织研磨仪上;
c,设置研磨参数:频率为60hz,时间45s,启动设备进行研磨;
d,待设备停止运行,取出研磨钢罐。
e,打开钢罐往里加1ml提取液手动混匀。再将样品转移至2ml离心管内,进行后续实验操作。
样品处理结果:
样品研磨前
样品研磨后