高通量组织研磨仪在低温破碎酵母细胞中的使用说明

条形酵母是将酵母通过小孔注入到装有液体氮的气罐中压缩制成的。将有1mm的筛子扣入到装有10-20 ml球状酵母的50ml破碎罐的顶部，经过离心破碎变成了2L的条状物。压力是由人工用60ml的自由活塞注射器注入罐内，条状可以在-80C°下被保存。
        使用上海净信Tissuelyser全自动样品快速研磨仪对酵母进行研磨，将不锈钢钢珠和样本分别装入研磨钢罐中，然后放入到用聚苯乙烯盒子盛放的液氮中，当预冷冻过程结束后，时间一分钟左右，或者直到原来沸腾的液体氮恢复平静，将破碎罐从液氮中取出，并要将破碎罐沾有的液体全部清理干净，以避免在破碎过程中发生爆炸。研磨钢罐用坩埚钳或大镊子夹取出来，而且通常要带经过冷冻的手套，冻伤以免。
       研磨钢罐中酵母量不要太多，否则可能会研磨不充分，留有残渣，一般为研磨钢罐的1/3左右为宜，把刚从液氮中取出的钢罐安装在净信Tissuelyser全自动样本快速研磨仪中，分5次进行研磨，设置频率55hz，20s，每次间隔都把研磨罐放入液氮中冷却。
       在每次破碎后都要将破碎罐取下，放入到液氮中进行冷冻，当液氮不在沸腾时，可以将钢罐取出，破碎可以继续进行。
       经过100秒的破碎后，我们通过显微镜观察可以发现95%的酵母已经达到破碎效果，用于下一步的实验过程。剩余的酵母可以储存，备用。
       研磨钢罐和钢珠都可重复利用，破碎罐和破碎球可以用温的乙醇清洗，放到干燥处贮存。