组织研磨机对拟南芥或水稻穗RNA的快速提取步骤

组织研磨机对拟南芥或水稻穗RNA的快速提取步骤

实验步骤

方法1  湿磨法

1.取打碎机适配器于-80°冷冻约15min。

2.取一指节长度的花序，带上一片叶子，（材料量可多可少，7d大小的苗地上部分也能提出RNA），放入国产2ml EP管中，加一粒钢珠，液氮速冻。之后用镊子取出，快速加入适配器中。（用国产的EP管即可，进口的管子液氮冻过后，容易裂）

3.打碎15s，10单位频振。（水稻嫩叶为。45S，12单位频振 老叶为，70S   12单位频振 ）

4.将材料再次放入液氮中。

5.用磁铁吸出钢珠，加入1研磨单位Trizol，余下步骤即正常的RNA提取步骤。

方法2  干磨法

1.取一指节长度的花序（材料量可多可少，7d大小的苗地上部分也能提出RNA），放入国产2研磨单位EP管中，加一粒钢珠，400ul Trizol。

2.打碎1min 10单位频振（水稻嫩叶为。45S，2单位频振   老叶为，70S   2单位频振 ） 。

3.吸出钢珠，补0.12mlTrizol。

4.余下步骤即正常的RNA提取步骤。